scar preguntado en Ciencias y matemáticasBiología · hace 1 década

¿ayuda biologia super urgente ayuda!!!!!!!!!!!!!!!!!?

Bueno gente de yahoo respuestas les debe hacer la sgt. pregunta:

Las muestras Histológicas ( lo que estudia todo lo relacionado a los tejidos) se preparan en placas de vidrios llamadas porta-objetos, pero ¿cómo se hace para preparlas al portaobjetos? bueno esa es mi pregunta ayudenme rapido por favor.

1 respuesta

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  • Anónimo
    hace 1 década
    Respuesta preferida

    Hola:

    Aquí tienes el procedimiento para preparar un corte histológico.

    1. Obtener una muestra del tejido.

    2. Fijación. Consiste en el tratamiento del tejido con sustancias químicas a fin de inactivar ciertas enzimas celulares que de otra manera iniciarían la autolisis y llevarían a la degeneración postmórtem. La fijación mantiene las estructuras al estimular la formación de enlaces cruzados entre las proteínas.

    3. Lavado: Se hace para eliminar el exceso de fijador. Existen medios de inclusión que son hidrófobos y precisan de la eliminación de agua en la muestra. Tenemos pues que hacer una deshidratación. Debido a que una gran parte del tejido está constituido por agua, se aplica una serie gradual de soluciones acuosas de menor a mayor grado de agente deshidratante, por ejemplo, Alcohol Etílico. Iniciando con alcohol al 0,5%, luego con una solución de 10%, 20%... 80%, 90%, 95% y alcanzando de manera paulatina el alcohol al 100 % para eliminar el agua.

    4. Aclaramiento o diafanización: Luego de deshidratar el tejido, se pasa a una solución de una sustancia que es miscible tanto con el alcohol como con el medio de inclusión a utilizar (en la mayoría de los casos se utiliza como medio de inclusión Parafina líquida). La sustancia comúnmente utilizada es el Xileno o Xilol.

    5. Inclusión: Por lo general, los tejidos son estructuras blandas y frágiles, incluso después de la fijación. De tal forma que previo a la obtención de los cortes, es necesario incluirlos en un medio de soporte. Los medios más utilizados son las ceras o resinas. En estado líquido, estos medios tienen la capacidad de penetrar y rodear el tejido, de esta forma se puede producir el endurecimiento (por enfriamiento o por polimerización), para formar un bloque sólido que pueda ser cortado fácilmente en el microtomo.

    6. Corte: El especimen ahora se puede cortar en secciones lo suficientemente delgadas como para permitir el paso de la luz. La mayor parte de los preparados para microscopía óptica tienen un grosor entre 5 a 10 micrómetros. Para estos cortes se utiliza un aparato llamado microtomo, con cuchillas de acero. Cuando deseamos estudiar grasas o lípidos que se extraen en el proceso de aclaramiento o enzimas que quedan inactivadas por el calentamiento de la inclusión, nos auxiliamos con la Técnica de Congelación de Tejidos. Un tejido congelado, es los suficientemente duro para ser cortado. Se sumerge la muestra de tejido en Nitrógeno líquido para tener una congelación rápida. Luego se corta con un aparato especial denominado microtomo de congelación.

    7. Montaje: Si queremos fijar las muestras una vez cortadas a un portaobjetos para observar a microscopio óptico, utilizamos 2 métodos de montaje:

    a) Baño termostatizado: Consiste en una cubeta dentro de la cual nos encontramos con la solución de montaje, que en nuestro caso está formada por gelatina 1% a 38ºC que hace la función de adhesivo de la muestra en el portaobjeto.

    b) Plancha caliente: Primero hay que preparar una solución de montaje (albúmina, glicerina.) que funcionan como adhesivos. Esta solución la prepararemos a partir de una solución madre que hay que diluir. El portaobjetos lo ponemos sobre la plancha y añadimos la solución de montaje, unas gotas. Sobre la solución de montaje ponemos las muestras a estudiar. Escurrimos el exceso y dejamos secar sobre la plancha.

    8. Coloración: Indispensable que las muestras sean transparentes o muy claras, y como utilizaremos microscopio compuesto, tenemos que colorear o contrastar.

    Hay variaciones en los métodos, de modo que el procedimiento arriba indicado en sólo uno de ellos.

    Saludos y que estés bien.

    Fuente(s): Soy médico, coautor de Biología I y II, Trillas (www.mendoza-sierra.org)
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