Anónimo
Anónimo preguntado en Ciencias y matemáticasBiología · hace 1 década

Métodos para recuperar ADN de geles de agarosa?

Que no sea el método de bolsas de diálisis, otro. Y que problemas pueden presentarse para recuperar el ADN del gel??

1 respuesta

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  • hace 1 década
    Respuesta preferida

    Yo uso un kit de quigen, que se llama Gel purification kit. El proceso empieza cuando cortas la banda del gel, luego le agregas reactivos para digerir la agarosa y disolverla, de ahipurificas en columnas por tama~o. lavas la columna y resuspendes el producto de PCR en agua o un buffer como el TA.

    Desventajas: la eficiencia es como del 75% en comparacion con columnas de purificacion normales donde la eficiencia esta por el 95%.

    Si tienes mas de una banda en tu gel, tienes que tenerlas bien separadas para no cortar otros productos del gel. Para hacer eso tienes que correr el gel por bastante tiempo y eso hace que se pierda ADN.

    El mayor problema para recuperar ADN de gel es que el ADN se desnaturaliza y rompre en fragmentos mas peque~os cuando lo corres por mucho tiempo, por lo que hay q ser cuidadoso si es que quieres recuperar fragmentos grandes (>30kb).

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